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JMT日本医疗——分离对肝癌微环境分析重要的干细胞,可在单个细胞水平上分析①

点击量:73   日期:2022-10-12 10:15    编辑:JMT日本医疗

极力抑制热应激相关伪影,高效率分离干细胞

 

大阪公立大学9月12日宣布,开发出了从伴有肝癌的高度脂肪肝中分离出肝细胞的方法,明确了在癌微环境中肝细胞单细胞水平的性质变化。该研究是由大阪公立大学研究生院医学研究科病理生理学的大谷直子教授、山岸良多助教、程祎特任助教、肝胆胰病理内科学的河田则文教授等人组成的研究小组进行的。研究成果在线发表在《Cellular and Molecular Gastroenterology and Hepatology》上。

 

癌的组织不仅仅是癌细胞本身,还有肝细胞等各种各样的细胞种类聚集在一起构成癌微环境。癌微环境的变化对癌症的进展很重要,但在肝癌的情况下,研究小组在先前的研究报告中指出,存在于肿瘤部位的肝细胞分泌的因子会抑制抗肿瘤免疫,促进肝癌的发展。因此,为了理解肝癌的特性,有必要从包括以脂肪肝为基础的肿瘤部在内的各种各样的状态的肝脏,开发分离肝细胞的方法,分析微环境中的肝细胞的性质​。

 

近年来,随着单细胞RNA序列分析方法的发展,在一个细胞水平上分析细胞性质成为可能。到目前为止,虽然有从老鼠的正常肝中分离出肝细胞的方法,但是从内脏脂肪堆积较多的肥胖老鼠的脂肪肝,以及脂肪肝引起的肝癌部分离肝细胞的高效率方法还没有被开发出来。另外,在37度的环境下进行细胞分离时使用的酶处理,热应激相关基因的表达明显上升,这是一个伪影。因此,需要极力抑制热应激相关伪影的方法。

 

通过确保回流通道和低温下的细胞分离来克服问题

 

呈脂肪肝的肥胖小鼠的内脏脂肪高度积累,下腔静脉由于内脏脂肪,非常不容易看见,所以从正常小鼠肝中分离出肝细胞时,从回流使用的下腔静脉的回流通道的确保非常重要。因此,研究小组通过使用即使是高度肥胖的老鼠也能确保回流路线的门静脉通道,克服了这一点。

 

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