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JMT日本医疗——操作细胞的微环境③

点击量:103   日期:2022-11-24 10:16    编辑:JMT日本医疗

并且,为了观察化学刺激引起的微环境中含有的细胞分泌物浓度的经时变化,对单核细胞进行了脂多糖的刺激。脂多糖有激活免疫细胞的作用,对于单核细胞,促进炎症时大量产生的TNFα的分泌。在受脂多糖刺激的单核细胞的微环境中发现的TNFα浓度是指在未受刺激细胞的微环境中TNFα总是高于浓度,浓度差随着时间的流逝而变大(图4右上)。

 

另外,在该实验系统中检测出微环境中的细胞数(1500~1900细胞)的TNFα以浓度为基础,每个细胞的TNFα计算产出量,用脂多糖刺激的单核细胞与相邻环境中未刺激的单核细胞相比,TNF是3~4倍α显示了产量(图4右下)。当受到脂多糖刺激时,为了让单核细胞在30分钟左右达到TNFα产出,本设备的脂质多糖导入,可以说只在作为对象的单核细胞的微环境中进行。

 

根据以上的结果,本装置,从同样被培养了的数百万个细胞中选择数个~2000个细胞发送化学刺激的微环境操作被证实了。

 

JMT日本医疗——操作细胞的微环境③

图4 向微环境导入脂多糖刺激和产生的细胞分泌物(TNFα)数量

左图细胞刺激时的俯视图。从右毛细管导入含有脂质多糖的细胞培养液,从左毛细管导入不含有脂质多糖的细胞培养液。从红箭头毛细管中回收受到脂多糖刺激的细胞的分泌物,从白箭头毛细管中回收没有受到刺激的细胞的分泌物。另外,黑色箭头的毛细管用于回收过剩的导入液体,在邻接的区域设定脂多糖导入环境和非脂多糖导入环境。

 右上图受脂多糖刺激的细胞和未受刺激的细胞在各微环境中的TNFα显示浓度随时间变化的曲线图。测量在刺激开始后30分钟、60分钟、90分钟进行。1皮克(pg)为1兆分之1g。

 右下图受脂多糖刺激的细胞和未受刺激的细胞分泌的每细胞TNFα计算产量的图表。测量在刺激开始后30分钟、60分钟、90分钟进行。1毫克(fg)为1000兆分之1g。

 

今后展望

 

本研究通过微流体操作,在培养数百万个细胞的细胞培养液中,对影响数个~数千个细胞的微环境导入化学刺激,成功测定了细胞分泌到微环境中的分子​。与以往的微流体设备不同,由于不会将细胞封闭在狭窄的空间里,所以可以操作处于更接近生理环境状态的细胞的微环境,进行细胞分泌物的分析。

 

作为本研究应用例,分析从局部细胞组织分泌到微环境的RNA等遗传物质,从多个细胞中仅对任意细胞进行分化诱导,从均匀的细胞形成与脏器形成相连的多种细胞的图案化设想使用胰蛋白酶的三维细胞组织结构(有机质[7])的造型等。

 

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