JMT日本医疗——发现肺纤维化发病的中心机制，特发性肺纤维化的治疗之光②

点击量：4968   日期：2023-10-19 10:23    编辑：JMT日本医疗

研究方法成果

共同研究小组首先调查了肺纤维化是如何进行的。向小鼠气管内投用诱导肺纤维化的药剂，诱导肺纤维化，对生物体的肺纤维化发病过程进行了历时性评价，结果确认：1）Ⅱ型肺泡上皮细胞的DNA损伤，2）炎症，3）肌成纤维细胞的诱导，4）纤维化发生。

其次，为了验证在不产生炎症的环境中是否也能诱导纤维化，从生物体中分离出引起炎症的免疫细胞以外的肺组织，在试验管内进行了使布霉素作用的实验。在这种情况下，也发现了肌成纤维细胞的诱导，显示了纤维化过程中炎症不是必须的可能性。

因此，为了在细胞水平、分子水平上更详细地评价肺纤维化，研究人员决定用流式细胞仪的方法只取出小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞，通过三维培养其，制作肺泡有机质，调查其与肺成纤维细胞的相互作用。

通过使用流式细胞仪从小鼠肺部取出Ⅱ型肺泡上皮细胞并对其进行三维培养，形成了如右的球体肺泡有机质（直径约2mm）。

通过在肺泡有机质上作用布霉素诱导DNA损伤，之后共同培养肺成纤维细胞，对向肌成纤维细胞的分化进行实时成像。通过结合红色荧光蛋白的报道基因的表达来监测向肌成纤维细胞的分化。

其次，为了明确受到DNA损伤的Ⅱ型肺泡上皮细胞获得纤维化诱导能力的过程，网罗性地分析了肺泡类固醇中表达的基因。结果显示，服用布霉素受到DNA损伤的有机质中，细胞老化的代表性信号p53信号增高。因此，用提高p53信号的药剂处理肺泡有机质后，观察到即使不投用布霉素，周围的肺成纤维细胞也能被肌成纤维细胞诱导。这表明，接受p53信号分泌的因子与纤维化的诱导有关。

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